凍干機如何在血液中制備抗菌肽？抗菌肽原指昆蟲體內經誘導而產生的一類具有抗菌活性的堿性多肽物質，由20～60個氨基酸殘基組成。這類活性多肽多數(shù)具有強堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點。在養(yǎng)殖業(yè)里，主要用于替代抗生素作保??；可用于治療免疫缺陷疾病，主要作用抗菌、免疫調節(jié)、修復損傷。

    國內外關于雞源抗菌肽的研究，主要針對雞小腸中的抗菌肽，而血中抗菌肽的提取及抗菌活性研究在國內外卻很少有報道。目前，我國雞的飼養(yǎng)量很大，屠宰雞的下腳料雞血很多，對其進行抗菌肽的提取和研究，是對資源的利用和再開發(fā)，是很有必要的。

   雞血中抗菌肽的提取方法，其特征在于:它包括如下具體步驟:

     一、雞血采集:從屠宰場采取新鮮雞血2-3L，使用5%檸檬酸鈉抗凝； 

    二、萃取:將新鮮雞血放置37℃溫箱靜置l_2h，取上清按照1:4的比例加入0.84%氯化銨溶液，混勻靜置3min,常溫400r/min離心10min,棄上清按比例加入氯化銨溶液混勻靜置3min，再次500r/min離心10min ;棄上清，使沉淀與少量4℃的生理鹽水短時間混合，再用200ml的4℃的10%冰醋酸使沉淀懸浮，充分混勻，倒入50ml燒杯，超聲波處理50次，然后溶液使用磁力攪拌器混勻攪動于4℃下萃取一夜；次日，將萃取的溶液取出15000r/min離心30min，取上清4℃下保存，沉淀再次混懸于冷的10%醋酸中，充分混勻，混勻攪動于4℃下萃取一夜；第三天將萃取的溶液取出15000r/min離心30min，最后將溶液4℃下保存； 

    三、除酸、濃縮:合并所保存的溶液，將溶液注入透析袋，扎緊袋口，然后將其放入燒杯，再向燒杯中倒入蒸餾水，蒸餾水液面要超過透析袋，4℃下透析除酸，每12h換水一次，直至透析袋外蒸餾水pH大于6，將透析袋放入瓷盤中，撒上聚乙二醇6000，透析濃縮約3-4h后即可將透析袋取出，將濃縮的溶液取出低溫凍干，轉移至青霉素小瓶中，密封-20℃保存； 

    四、抗菌肽的分離:將凍干樣品用0.5%甲醇溶解，再上樣于層析柱葡聚糖凝膠SephadexG25,同時打開柱的下端出口，注意控制流速為lmL/min,5mL/管,用部分收集器收集洗脫液，5mL/管，收集的溶液用紫外分光光度計測其在280nm處的吸收值，將在280nm處有吸收的溶液分裝于青霉素瓶中，再在低溫凍干機中凍干，-80℃保存，取各瓶凍干保存的樣品各20mg，分別溶于滅菌雙蒸水中，無菌條件下用微孔濾膜過濾樣品，將藥敏紙片浸泡于過濾后的樣品中，浸泡過夜后，用平皿紙片法初篩，收集具有抗菌活性的組分，置于5℃保存； 

   五、抗菌肽的純化與濃縮:使用超濾裝置進行超濾，膜包選用截流分子量為20kD，洗脫液選用0.5%甲醇溶液，濾出液 既 為所要獲得的溶液。

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