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土壤凍干機在底泥中抗生素測定的應用

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土壤凍干機在底泥中抗生素測定的應用,包括以下步驟:

     (1)樣品制備:通過凍干機在低溫真空環(huán)境下把土壤冷凍干燥,然后再研磨;

     (2)提取步驟:稱取一定量凍干研磨后的樣品,加15mL磷酸鹽緩沖鹽,用NaOH 或HC1溶液調節(jié)pH至4~5后,加入同位素提取內標液;再加入20mL乙臆后,超聲重復提取二 次,合并提取液,旋蒸濃縮。

    (3)分離凈化步驟:用4mL甲醇洗脫小柱兩次,洗脫液收集于10mL玻璃離心管中;最 后將洗脫液氮吹濃縮(干浴溫度為35°C)至恰好吹干,加入500yL含0.025%甲酸的甲醇/水 (體積比1:1)和50ng進樣內標液,渦旋混合均勻,用0.22μπι的針筒過濾器過濾后,保存于自 動進樣樣品瓶中,作為儀器的凈化試樣;
    (4)分析檢測步驟:HPLC_MS/MS測定:使用高效液相色譜儀和質譜儀測定,色譜柱為C18液相色譜柱,3.5μπιX 3.0mmX 150mm,。電噴霧電離源(,多反應監(jiān)測模式,HPLC條件為:進樣體積10yL;柱溫40 °C;流動相為高純水(含0.01%的甲酸)和乙腈,流速為0.40 111171^11;通過各目標物的保留時 間、定性離子對進行定性分析;通過同位素的峰面積比值進行定量分析,得出凈化試樣的測 定結果。
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